Sterilizācijair šūnu bioloģijas un biomedicīnas eksperimentu stūrakmens. Lielākā daļa biomedicīnas laboratoriju nespētu veikt nekādu darbu, kas saistīts ar dzīvo šūnu kultivēšanu bez sterilizētiem laboratorijas instrumentiem. Lai gan daudzām laboratorijām ir neformālas attiecības ar sterilitāti, ir ārkārtīgi reti nenovērtēt sterilu laboratorijas instrumentu ietekmi. Tomēr sterilizācija bieži tiek uzskatīta par svarīgu darbu sākuma līmeņa laboratorijas personālam, līdzīgi kā stikla trauku tīrīšana.
Vājš instrumenta sterilizācijas process var radīt lielākus finansiālus zaudējumus nekā pilnīgs sterilizācijas iekārtu trūkums. Ja laboratorijas izmanto slikti sterilizētu aprīkojumu, eksperimenti var viegli tikt piesārņoti, radot zaudējumus nelietojamu vai neparastu rezultātu dēļ. Dažos gadījumos piesārņots aprīkojums var piesārņot citus instrumentus vai aparatūru, izraisot laboratorijas vairākas eksperimentālas kļūmes, kuras var būt grūti izolēt un novērst. Lai izvairītos no šīm neadekvātās sterilizācijas kļūmēm, ir nepieciešama stingra un uz rezultātiem orientēta pieeja sterilitātes novērošanai — prakse, ko varētu izmantot daudzas laboratorijas.
Kādi instrumenti ir jāsterilizē?
Sterilizācija ir ārkārtīgi svarīga jebkurai laboratorijai, kas veic šūnu kultivēšanas darbu, tik ļoti, ka nav pārspīlēts teikt, ka visi laboratorijas instrumenti, kas saistīti ar šūnu kultūru, ir jāsterilizē. Lielākajai daļai laboratoriju ir daudz aparatūras, un pat tad, ja tās veic šūnu kultūru, tās nav tieši iesaistītas šūnu kultūras darbā. Svarīgi, ka pat iekārtas, kas nav iesaistītas šūnu kultūrā, var gūt labumu no sterilizācijas — pieņemot, ka laboratorija var atļauties sterilizācijas izmaksas.
Piemēram, laboratorijām, kas regulāri veic ģenētisko sekvencēšanu vai PCR, var būt sarežģīts ekonomisks piedāvājums sterilizēt pipetes un termiskos ciklus, kas nepieciešami molekulārās bioloģijas darba veikšanai. Tā kā šīs ierīces nav iesaistītas šūnu kultūrā, sekas, ja tās nav pilnīgi sterilas, ir minimālas, vismaz tā ir. Būtiski, ka šis pamatojums ir nepareizs.
Lai gan ir taisnība, ka šo instrumentu bioloģiskais piesārņojums neizraisīs ļoti dārgu šūnu kultūras eksperimentu nāvi pēc nepareizu mikroorganismu iedarbības, pat ex vivo eksperimentu rezultātus var sabojāt nepareiza bioloģisko materiālu iedarbība.
Sterilizācija ir svarīgs piesardzības pasākums pat laboratorijas aparatūrai, kas nekad nav bijusi tieši pakļauta nevienam bioloģiskam materiālam. Piemēram, dezinficējot bioloģiskās drošības kabineta iekšpusi, laboratorija var nodrošināt, lai tās eksperimentu darbvieta nekļūtu par piesārņojuma avotu. Tāpat stikla trauku sterilizēšana nodrošina, ka tos var izmantot blakus sensitīviem eksperimentiem, nebaidoties sabojāt rezultātus.
Tomēr ne visām laboratorijām ir līdzekļi, lai sterilizētu visu, kas varētu gūt labumu. Sterilizācija bieži ir dārga, tāpēc lielākā daļa laboratoriju par prioritāti izvirza kritisko iekārtu sterilizāciju, vienlaikus ļaujot citiem instrumentiem, kas atrodas ārpus šūnu kultūras zonas, palikt nesterilizēti. Tāpēc sterilizācijas resursu kataloģizēšana ir labs ieradums laboratorijas darbinieku attīstībai, jo aparatūra, kuru nevar izmantot bez sterilizācijas, ir maz noderīga, ja lielākā daļa citu laboratorijas iekārtu netiek sterilizētas secīgi.
Kas laboratorijām nepieciešams instrumentu sterilizācijas laikā
Sterilizācijas procesam ir vairāki dažādi posmi, un katram laboratorijā ir nepieciešams atšķirīgs telpas daudzums. Sterilizācijas procesa telpiskā sarežģītība ir atkarīga no tā, vai laboratorija veic pētniecību, klīnisko darbu vai ražošanu. Ražošanai un klīniskajam darbam ir augstāki sterilitātes standarti nekā pētniecības darbam, tāpēc sterilizācijas telpu nošķirtība un sarežģītība ir acīmredzamāka. Īsāk sakot, sterilizācijas procesam nepieciešamas trīs vietas:
dekontaminācijas zona
iepakojuma zona
Sterilizācijas zona
Katrai telpai ir atšķirīgs mērķis, kas atbilst sterilizācijas procesa posmam, kurā tā ir atbildīga par mājokli. Dekontaminācijas zona ir vieta, kur tiek noteikts sterilitātes pamats, noņemot pēc iespējas vairāk piesārņotāju, izmantojot neapstrādātas metodes, piemēram, tīrīšanu ar nesterilu ūdeni vai tīrīšanas ķimikālijām.
Tā kā dekontaminācija bieži ir nekārtīga lieta, lielākā daļa laboratoriju dod priekšroku dekontaminācijas telpai ārpus galvenās laboratorijas darba vietas. Dekontaminācijas mērķis ir likvidēt visu redzamo piesārņojumu no sterilizējamā instrumenta vai aprīkojuma. Tas var ietvert jebko, sākot no netīrumu gabaliņiem un beidzot ar tīrīšanas ķimikālijām. Ir svarīgi, lai dekontaminācijas process neatstātu neko, kas nebija pirms procesa sākuma. Tāpēc lielākā daļa dekontaminācijas procesu beidzas, iekārtas tīrot ar ūdeni.
Pēc dekontaminācijas laboratorijai ir jāiepako dekontaminējamais aprīkojums tā, lai aparatūras funkcionālās virsmas varētu tikt pakļautas sterilizatoram, bet ne āra gaisam vai jebkurai citai videi, kas varētu izraisīt jaunu piesārņojumu.
Piemēram, lai izmantotu karstu tvaiku, lai sterilizētu mucas iekšpusi autoklāvā, mucu "iepakotu", mucas mutes augšpusē brīvi uzliekot folijas gabalu un pielīmējot to pie sāniem. Tātad, veicot autoklāvu. Kad karstais tvaiks sterilizatorā sterilizē spaini, tvaiks var plūst zem folijas, sterilizējot kausa funkcionālo virsmu (iekšpusi, kas satur šķidrumu), un pēc tam izplūst. Tā kā folija ir pielīmēta pie mucas, mucas funkcionālā virsma paliks aizsargāta no elementiem un sterila pat pēc mucas noņemšanas no autoklāva. Tomēr laboratorijām, kas apstrādā klīniskos materiālus vai ražo medikamentus, sterilā iepakojuma standarts pārsniedz vienkāršu folijas kausa risinājumu.
Sterilizācijas zona ir sterilizācijas procesa sirds. Atkarībā no laboratorijas pieejas sterilizācijas zonā var izmantot vienu no vairākām dažādām sterilizācijas metodēm. Šīs metodes var ietvert karstu tvaiku un spiedienu, piemēram, standarta laboratorijas autoklāvā, vai eksotiskākas metodes, piemēram, gamma staru apstarošanu. Lielākā daļa laboratoriju pieturas pie jebkuras to iestādē pieejamās sterilizācijas metodes, kas nozīmē lielāko daļu laika izmantot autoklāvu. Tomēr laboratorijās, kas nodarbojas ar farmaceitisko līdzekļu vai medicīnas ierīču ražošanu, apstarošana ir biežāka.
Sterilizācijas procesa apstiprināšana
Kad sterilizācija ir pabeigta, lielākajai daļai laboratoriju ir viena no vairākām metodēm, lai pārbaudītu, vai to aprīkojums ir patiešām pilnībā sterilizēts, nevis tikai daļēji sterilizēts. Vienkāršākais veids, kā to pārbaudīt, ir ar pazemīgo autoklāva lenti. Lai gan tā ir piemērota tikai sterilizācijas pārbaudei autoklāvā, autoklāva lente ir efektīva, jo, pakļaujot sterilizācijas apstākļiem, tā mainās uz laiku, kas nepieciešams, lai garantētu pilnīgu sterilizācijas krāsu. Tāpēc daudzas laboratorijas sterilizācijas procesā plaši izmanto autoklāva lenti.
Sarežģītākai sterilizācijas validācijai nepieciešami šūnu kultūras eksperimenti. Tipiskā sterilizācijas verifikācijas eksperimentā dzīvotspējīgas baktēriju kultūras paraugs tiek izvadīts cauri laboratorijā izmantotajam sterilizācijas procesam, un pēc tam kultūras tvertni notīra, lai iegūtu dzīvotspējīgas šūnas. Pēc tam tamponus kultivē vairākas dienas un novēro jaunas šūnu kolonijas. Ja neizaug neviena kolonija, sterilizācijas process ir veiksmīgs.
Sterilizācijas cauruļvadu nodrošināšana, lai sasniegtu rezultātus
Lai laboratorijas varētu veiksmīgi sterilizēt saistīto šūnu kultūras aparatūru, tām ir jābūt atbilstošiem materiāliem. Sterilizācijas procesam nepieciešamo reaģentu, tīrīšanas līdzekļu un vienreizējās lietošanas lielo daudzumu var būt grūti izsekot, jo īpaši laboratorijām, kurās nav ilgas aseptiskās tehnikas vai sterilas ražošanas vēstures. Attiecībā uz visu, sākot no autoklāva lentes līdz dekontaminācijas stadijas tīrīšanas risinājumiem, darbs ar pieredzējušu piegādātāju ir galvenais faktors veiksmīgas sterilizācijas un eksperimentu nodrošināšanai.
