Šis ir oPtiskais mikroskopskurās gaismas iekļūšanas laikā nekrāsotā paraugā rodas nelielas gaismas novirzes jeb fāzes nobīdes. Šīs fāzes nobīdes pārvēršas attēlā, kas nozīmē, ka tad, kad gaisma iet cauri necaurspīdīgam paraugam, fāzes nobīde padara paraugu gaišāku, fonā radot apgaismotu (spilgtu) attēlu.
Fāzes kontrasta mikroskopija rada augsta kontrasta attēlus, strādājot ar caurspīdīgiem paraugiem, tāpēc tas jo īpaši attiecas uz mikrobu kultūru, plānu audu fragmentu, šūnu audu un subcelulāro daļiņu attēliem.
Fāzu kontrasta mikroskopijas darbības princips ir izmantot optiskās metodes, lai pārveidotu paraugu amplitūdas attēlā, ko skatās caur mikroskopa okulāriem.
PCM var izmantot, lai skatītu nekrāsotas šūnas (pazīstamas arī kā fāzes objekti), kas nozīmē, ka tiek saglabāta šūnu morfoloģija un šūnas var novērot to dabiskajā stāvoklī ar augstu kontrastu un efektīvu skaidrību. Tas ir tāpēc, ka, ja paraugi tiek iekrāsoti un fiksēti, tie iznīcinās lielāko daļu šūnu, ko nevar novērst spilgtā lauka gaismas mikroskopija.
Nobīdes, kas rodas gaismas iespiešanās laikā, tiek pārveidotas par amplitūdas izmaiņām, radot attēla kontrastu.
Apvienojumā ar kontrastu uzlabojošiem elementiem (piemēram, fluorescenci), tie ļauj labāk attēlot paraugu attēlus.
Fāzes kontrasta mikroskopa daļas
Fāzes kontrasta mikroskopa instrumenti ir balstīti uz gaismas ceļu no gaismas avota saņemšanas līdz attēla vizualizācijai.
Tāpēc tā secība sastāv no:
Gaismas avots (dzīvsudraba loka lampa)
grupas šāviens
atvērums
kondensators
Gredzenu kondensators
paraugs
Mērķis
foto plāksne
polarizēta gaisma
fāzes gredzens
Fāzes kontrasta mikroskopa īpašības
Izmaiņas, ko izraisa novirzītā izkliedētā (novirzītā) gaisma un nenovirzītā gaisma, kas sasniedz paraugu, kur tā tiek absorbēta, tiek radīta noteiktā viļņa garumā un rada krāsu. Izkliedētās gaismas un absorbētās gaismas radīto atšķirību sauc par amplitūdas izmaiņām. Šīs amplitūdas izmaiņas ir jutīgas, un tāpēc tās nevar vizualizēt ar tādu fotografēšanas aprīkojumu kā fāzes kontrasta mikroskopija, un tāpēc tās ir redzamas cilvēka acij.
Fāzes kontrasta mikroskopa kondensatoram ir necaurspīdīgs disks, ko sauc par gredzenu, savukārt caurspīdīgais gredzens rada gaismas konusu, kas iet cauri paraugam. Mainoties gaismai, daļa gaismas uz parauga tiek saliekta optiskā blīvuma izmaiņu dēļ, veidojot attēlu uz objektīva. Nenovirzīta gaisma skars fāzes plāksnes fāzes gredzenus, savukārt novirzītā gaisma palaidīs garām fāzes gredzenus, kas iet tieši caur fāzes plāksni, veidojot attēlu.
Fāzes kontrasta mikroskopi ir izstrādāti ar objektīviem, kas var veikt dažādas funkcijas, ja tos izmanto kopā ar kontrastu uzlabojošām metodēm, piemēram, fluorescenci. Objektīvs atrodas iekšējās fāzes plāksnē, kas maina tā gaismas absorbciju un fāzes nobīdi (ti, neizkliedē), radot plašu spektru, lai kontrastētu paraugu un radītu spēcīgu kontrastu fonā.
Fāzes kontrasta mikroskopijas pielietojumi
Nosakiet dzīvo šūnu, piemēram, dzīvnieku un augu šūnu, morfoloģiju
Pētīt mikroorganismu kustīgumu un kustību struktūru
Noteiktu mikrobu elementu, piemēram, baktēriju endosporu, noteikšana
